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更新时间:2025-11-10
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大家好,感谢邀请,今天来为大家分享一下限制性核酸内切酶的问题,以及和限制性核酸内切酶名词解释的一些困惑,大家要是还不太明白的话,也没有关系,因为接下来将为大家分享,希望可以帮助到大家,解决大家的问题,下面就开始吧!

限制性核酸内切酶(限制性核酸内切酶名词解释)
对。根据基因重组与基因工程中显示,限制性核酸内切酶的发现标志着dna重组时代的开始。限制性内切酶全称限制性核酸内切酶,是一种能将双股DNA切开的酶。切割方法是将糖类分子与磷酸之间的键结切断,进而于两条DNA链上各产生一个切口,且不破坏核苷酸与碱基。

限制性核酸内切酶(限制性核酸内切酶名词解释)
根据限制酶的结构,辅因子的需求切位与作用方式,可将限制酶分为三种类型,分别是第一型(TypeI)、第二型(TypeⅡ)及第三型(TypeⅢ)。
第一型限制酶
同时具有修饰(modification)及识别切割(restriction)的作用;另有识别(recognize)DNA上特定碱基序列的能力,通常其切割位(cleavagesite)距离识别位(recognitionsite)可达数千个碱基之远。例如:EcoB、EcoK。
第二型限制酶
只具有识别切割的作用,修饰作用由其他酶进行。所识别的位置多为短的回文序列(palindromesequence);所剪切的碱基序列通常即为所识别的序列。是遗传工程上,实用性较高的限制酶种类。例如:EcoRI、HindⅢ。
第三型限制酶
与第一型限制酶类似,同时具有修饰及识别切割的作用。可识别短的不对称序列,切割位与识别序列约距24-26个碱基对。例如:HinfⅢ。
扩展资料
限制性内切酶分类性质
根据酶的功能特性、大小及反应时所需的辅助因子,限制性内切酶可分为两大类,即I类酶和Ⅱ酶。最早从大肠杆菌中发现的EcoK、EcoB就属于I类酶。其分子量较大;反应过程中除需Mg2+外,还需要S-腺苷-L甲硫氨酸、ATP;在DNA分子上没有特异性的酶解片断,这是I、Ⅱ类酶之间最明显的差异。
因此,I类酶作为DNA的分析工具价值不大。Ⅱ类酶有EcoRI、BamHI、HindⅡ、HindⅢ等。其分子量小于105道尔顿;反应只需Mg2+;最重要的是在所识别的特定碱基顺序上有特异性的切点,因而DNA分子经过Ⅱ类酶作用后,可产生特异性的酶解片断,这些片断可用凝胶电泳法进行分离、鉴别。
限制性内切酶识别DNA序列中的回文序列。有些酶的切割位点在回文的一侧(如EcoRI、BamHI、Hind等),因而可形成粘性末端,另一些Ⅱ类酶如AluI、BsuRI、BalI、HalⅢ、HPaI、SmaI等,切割位点在回文序列中间,形成平整末端。
参考资料来源:百度百科-限制性核酸内切酶
1、位置:
一条单链DNA上可能有多个识别位点,但一个识别位点只有一个酶切位点。
2、对称性:
限制酶的识别位点大多数为回文对称结构,切割位点在DNA两条链一定是相对称的位置。
3、识别碱基个数:
限制酶识别位点的长度一般为4-8个碱基,切割位点只是识别两个碱基
扩展资料:
1、限制性核酸内切酶三种类型:
(1)第一型限制酶:
同时具有修饰及识别切割的作用;另有识别DNA上特定碱基序列的能力,通常其切割位距离识别位可达数千个碱基之远。例如:EcoB、EcoK。
(2)第二型限制酶:
只具有识别切割的作用,修饰作用由其他酶进行。所识别的位置多为短的回文序列;所剪切的碱基序列通常即为所识别的序列。是遗传工程上,实用性较高的限制酶种类。例如:EcoRI、HindⅢ。
(3)第三型限制酶:
与第一型限制酶类似,同时具有修饰及识别切割的作用。可识别短的不对称序列,切割位与识别序列约距24-26个碱基对。例如:HinfⅢ。
2、限制性核酸内切酶生理意义:
(1)实际就是限制酶降解外源DNA,维护宿主遗传稳定的保护机制。
(2)甲基化是常见的修饰作用,可使腺嘌呤A和胞嘧啶C甲基化而受到保护。通过甲基化作用达到识别自身遗传物质和外来遗传物质的目的。
(3)能产生防御病毒侵染的限制酶的细菌,其自身的基因组中可能有该酶识别的序列,只是该识别序列或酶切位点被甲基化了。
(4)不是说一旦甲基化了,所有限制酶都不能切割。大多数限制酶对DNA甲基化敏感,因此当限制酶目标序列与甲基化位点重叠时,对酶切的影响有3种可能,即不影响、部分影响、完全阻止。
(5)对甲基化DNA的切割能力是限制酶内在和不可预测的特性,因此,为有效的切割DNA,必须同时考虑DNA甲基化和限制酶对该类型甲基化的敏感性。
(6)另外,大部分商业限制酶如今专门用于切割甲基化DNA。
参考资料来源:百度百科-限制性内切酶
参考资料来源:百度百科-酶切位点
限制性内切酶是能够识别并附着双链DNA分子中特定脱氧核苷酸序列,并由此切割DNA双链磷酸二酯键的一类酶,并由此产生的两种切割末端,粘性末端和平齐末端。
影响限制性内切酶活性的因素有多种,稍有不慎,可能就会导致酶切反应的失败,除了常见的底物浓度、反应温度等因素,还有以下三种需额外注意。
1、保护碱基
酶蛋白在进行切割时,需占据识别位点两边的若干个碱基,被称为保护碱基。
2、质粒高级结构
部分限制性内切酶无法切割高级结构的质粒,这时候就需适当加大酶的使用量,或用可适应高级结构的限制酶线性化质粒后再行切割。
3、甲基化保护
甲基化是细菌用来保护自己的基因序列不被内源性内切酶切割的一种机制。常见甲基化:Dam+、Dcm+、EcoKI+、EcoBI+与CpG(真核细胞)等。在实验中一定要注意宿主细胞的甲基化信息。
扩展资料
限制作用实际就是限制酶降解外源DNA,维护宿主遗传稳定的保护机制。
甲基化是常见的修饰作用,可使腺嘌呤A和胞嘧啶C甲基化而受到保护。通过甲基化作用达到识别自身遗传物质和外来遗传物质的目的。所以,能产生防御病毒侵染的限制酶的细菌,其自身的基因组中可能有该酶识别的序列,只是该识别序列或酶切位点被甲基化。
但并不是说一旦甲基化,所有限制酶都不能切割。大多数限制酶对DNA甲基化敏感,因此当限制酶目标序列与甲基化位点重叠时,对酶切的影响有3种可能,即不影响、部分影响、完全阻止。
对甲基化DNA的切割能力是限制酶内在和不可预测的特性,因此,为有效的切割DNA,必须同时考虑DNA甲基化和限制酶对该类型甲基化的敏感性。另外,大部分商业限制酶如今专门用于切割甲基化DNA。
参考资料来源:百度百科-限制性核酸内切酶
限制性核酸内切酶是可以识别特定的脱氧核苷酸序列,并在每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶,简称限制酶。根据限制酶的结构,辅因子的需求切位与作用方式,可将限制酶分为三种类型,分别是第一型(TypeI)、第二型(TypeII)及第三型(TypeIII)。Ⅰ型限制性内切酶既能催化宿主DNA的甲基化,又催化非甲基化的DNA的水解;而Ⅱ型限制性内切酶只催化非甲基化的DNA的水解。III型限制性内切酶同时具有修饰及认知切割的作用。
用途:
1、用于DNA基因组物理图谱的组建;基因的定位和基因分离;DNA分子碱基序列分析;比较相关的DNA分子和遗传工程。
2、限制性核酸内切酶是由细菌产生的,其生理意义是提高自身的防御能力.
3、限制酶一般不切割自身的DNA分子,只切割外源DNA。
限制作用实际就是限制酶降解外源DNA,维护宿主遗传稳定的保护机制。甲基化是常见的修饰作用,可使腺嘌呤A和胞嘧啶C甲基化而受到保护。通过甲基化作用达到识别自身遗传物质和外来遗传物质的目的。所以,能产生防御病毒侵染的限制酶的细菌,其自身的基因组中可能有该酶识别的序列,只是该识别序列或酶切位点被甲基化了。
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