凝胶渗透色谱（凝胶柱层析）

凝胶渗透色谱

凝胶渗透色谱(GelPermeationChromatography,GPC)是一种色谱技术，凝胶渗透色谱，它用高度多孔性的、非离子型的凝胶小球将溶液中多分散的聚合物逐级分开，配合分子量检测器使用即可得到分子量分布，是目前测定分子量分布最广泛应用的方法。

凝胶渗透色谱（凝胶柱层析）

凝胶渗透色谱法(GelPermeationChromatographyGPC)是一种新型的液相色谱。别名:体积排除色谱(SizeExclusionChromatography，SEC);凝胶过滤色谱(GelFiltrationChromatography，GFC)等。

1.GPC原理

2.GPC构造

泵系统、(自动)进样系统、凝胶色谱柱、检测系统和数据采集与处理系统。

凝胶柱层析

液相色谱技术的高速发展带动了凝胶渗透色谱柱制造技术的发展，也促进了凝胶填料和填装技术的发展，每根凝胶渗透色谱柱出厂时都标明了柱效，但每个厂家测定柱效的方法却大相径庭。凝胶渗透色谱柱是整个GPC分离系统的心脏，所以对色谱柱柱效能的评价非常重要。

和气相色谱一样，液相色谱试样中的各组分的谱带在通过色谱柱后都要变宽，各谱带要实现完全的分离，只有当它们的加宽不比它们的分离快时才能实现，凝胶渗透色谱，谱带的加宽实质上反映了色谱柱的分离效率：或者说柱效就是一根色谱柱提供窄谱带(小的W值)的能力。对于GPC的柱效评价问题，由于它的特殊性和复杂性，有必要在这里进行较为详细的讨论。

色谱柱的效率可以很好地表明色谱体系能使色谱峰扩张到什么程度。对于单分散的试样来说，在理想的情况下，GPC色谱图应该如图3-12a所示，凝胶渗透色谱，即应为一条直线。但在通常的条件下，所得到的GPC谱图却是图3-12b的情况。这就是如前所述的GPC的峰加宽反应，于峰加宽效应越大的柱子，则所得到的色谱峰形状就越宽，而测得的柱效也就越低。

凝胶渗透色谱法的原理

以多孔性物质作固定相，样品分子受固定相孔径大小的影响而达到分离的一种液相色谱分离模式。样品分子与固定相之间不存在相互作用力（吸附、分配和离子交换等），因而凝胶色谱又常被称作体积排斥色谱、空间排阻色谱、分子筛色谱等。比固定相孔径大的溶质分子不能进入孔内，迅速流出色谱柱，不能被分离。比固定相孔径小的分子才能进入孔内而产生保留，溶质分子体积越小，进入固定相孔内的机率越大，于是在固定相中停留（保留）的时间也就越长。

固定相：

化学惰性的多孔性材料，如聚苯乙烯凝胶、亲水凝胶、无机多孔材料。

流动相：

在凝胶色谱中，流动相的作用不是为了控制分离，而是为了溶解样品或减小流动相粘度。

凝胶过滤色谱（gelfiltrationchromatography，凝胶渗透色谱，GFC）：以水或缓冲溶液作流动相的凝胶色谱法。主要适合于水溶性高分子的分离。