单克隆抗体的制备过程（单克隆和多克隆抗体的优缺点）

单克隆抗体的制备过程

作者：南方医科大学深圳医院药剂科主管药师郑士奇

单克隆抗体的制备过程（单克隆和多克隆抗体的优缺点）

我们的免疫系统能制造多达数十亿种抗体，单克隆抗体的制备过程，单克隆抗体的制备过程，每一种抗体都对应着一个特异的标靶，比如某种毒素、细菌、病毒以及肿瘤细胞。抗体可以和这些标靶结合，并释放出信号，然后通过机体的免疫系统将其消灭。

抗体的这一特性迅速引起了医学界的关注，从理论上讲我们可以用抗体的这一特性，来治疗几乎所有感染性疾病、自身免疫性疾病以及恶性肿瘤。要达到这一目的，我们需要得到一种只针对对应的疾病，并且能够实现大规模生产的特异性抗体，也就是我们所说的单克隆抗体。

科学家们发现抗体是由B细胞分化而成的浆细胞是产生的，用特定的抗原对模式动物（例如小鼠或兔子）进行免疫，能获得我们做需要的抗体，比如，用灭活的流感病毒来免疫模式动物，获得针对流感的抗体。但是由于正常的浆细胞无法无法被培养，如何实现抗体的大规模生产一度成为困扰科学家的难题。直到多发性骨髓瘤的发现。

单克隆和多克隆抗体的优缺点

从培养液或腹腔积液获得的单克隆抗体，不需要纯化即可应用于日常诊断或定性研究。如果用于免疫标记测定，须分离和纯化。可用半饱和、饱和硫酸铵进行沉淀，进行初步浓缩和纯化；可用亲和层析法进一步纯化。

一、腹水型单抗的纯化

在单抗纯化之前，一般均需对腹水进行预处理，目的是为了进一步除去细胞及其残渣、小颗粒物质、以及脂肪滴等。常用的方法有二氧化硅吸附法和过滤离心法，以前者处理效果为佳，而且操作简便。

1、二氧化硅吸附法

新鲜采集的腹水（或冻存的腹水），2000r/min15分钟，除去细胞成分（或冻存过程中形成的固体物质）等；取上层清亮的腹水，等量加入PH7.2巴比妥缓冲盐水（VBS；0.004mol/L巴比妥，0.15mol/LNaCl，0.8mmol/LMg2+，0.3mmol/LCa2+）稀释；然后以每10ml稀释腹水中加150mg二氧化硅粉末，单克隆抗体的制备过程，混匀，悬液在室温孵育30分钟，不时摇动；2000g离心20分钟，脂质等通过该法除去，即可得澄清的腹水。

单克隆抗体的制备过程两次筛选

摘要：非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒引起猪的一种急性、出血性、高度接触性、高死亡率的传染病。从20世纪中期以来，已在非洲、欧洲和美洲等数十个国家流行，并在近几年内蔓延至欧亚两洲接壤处的格鲁吉亚、亚美尼亚、阿塞拜疆、俄罗斯及中国，给各国养猪业带来了极大的危害，目前尚无有效的疫苗和药物用来预防或治疗该病。非洲猪瘟单克隆抗体具有特异性强、高效、灵敏、便捷、成本低等特点，单克隆抗体在非洲猪瘟病毒快速诊断技术研究、致病机制、免疫机制和疫苗研制等方面有着重要的作用，加强对非洲猪瘟单克隆抗体研究意义重大，亟待进行。

关键词：非洲猪瘟病毒；单克隆抗体；结构蛋白，P72蛋白

非洲猪瘟(Africanswinefever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(Africanswinefevervirus,ASFV)引起的一种急性、热性、出血性猪传染病，急性感染死亡率为100%。急性和亚急性ASF常在多种器官上表现出严重的血管性病变，如肾脏出血、淋巴结弥漫性出血、肺水肿、脾脏充血性肿大、弥散性血管内凝血和血小板减少等。其主要临床症状是高热、皮肤发绀、有出血点、呕吐和便血等。因此，ASF被世界动物卫生组织(OIE)列为必须报告的法定动物疫病之一，我国将其列为一类动物疫病。1921年，在非洲的肯尼亚地区首次发现ASF。1957年，欧洲的葡萄牙第一次暴发ASF疫情，经过一段时间沉默后，该病于1960年在欧洲的一些国家出现并逐渐传播，2007年底进入俄罗斯。近年来东欧一些国家不断发生疫情，国际疫情形势十分严峻。2018年8月3日，农业农村部公布了辽宁省出现我国首例ASF疫情。截至2019年5月13日，全国31个省(市、自治区)和香港特别行政区先后出现130起疫情，单克隆抗体的制备过程，给我国养猪行业及相关产业造成了巨大的经济损失。