各种常见种类PCR概述介绍（各种常见种类pcr概述介绍图）

PCR是聚合酶链式反应（PolymeraseChainReaction）的简称，

1、普通PCR

普通PCR即一代PCR，使用普通PCR扩增仪扩增靶基因，并通过琼脂糖凝胶电泳对产物进行定性分析。

各种常见种类PCR概述介绍（各种常见种类pcr概述介绍图）

2、实时荧光定量PCR（QuantitativeReal-timePCR,qPCR）

实时荧光定量PCR，也叫Real-TimePCR，即二代PCR，是指在PCR扩增反应体系中加入荧光染料或者荧光基团，在整个PCR过程中通过收集荧光信号实时监测每一个循环中扩增产物量的变化，最后通过标准曲线和CT值对待测样品进行定量分析。qPCR常用的有两种方法：SYBRGreen法和TaqMan探针法。

①荧光染料法（SYBRGreen）：

优点：

缺点：

②荧光探针法（TaqMan技术）：

优点：

缺点：

注：

的一种新型PCR扩增技术。

3、数字PCR（DigitalPCR,Dig-PCR,dPCR）

数字PCR即三代PCR，是对原始PCR的另一种改进，是一种能够实现核酸绝对定量的精准检测技术，基于泊松分布原理将核酸样品分配到大量独立、平行的微反应单元（纳升级）中，使每个反应室中平均只有一个拷贝或者没有目标DNA分子，然后加入荧光信号进行扩增，从而实现靶标核酸分子的绝对计数，提高检测灵敏度和准确度。

4、逆转录PCR（ReverseTranscription-PCR,RT-PCR）

逆转录PCR也叫反转录PCR，将RNA的反转录（RT）和cDNA的聚合酶链式扩增相结合，是PCR的一种广泛应用的变形。在RT-PCR中首先经反转录酶将一条单链RNA逆转录成cDNA，再以cDNA为模板，扩增合成目的片段。作为模板的RNA可以是总RNA、mRNA或体外转录的RNA产物。无论使用何种RNA，关键是确保RNA中无RNA酶和基因组DNA的污染。RT-PCR技术灵敏且应用广泛，可用于检测细胞中基因表达水平，细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。一般通过一步法或两步法进行，一步法是RT反应和PCR反应在同一试管中进行；而在两步法中两个反应是分开依次进行的。

5、实时荧光定量逆转录PCR（Real-timeRT-PCR,RT-qPCR）

Real-timeRT-PCR是qPCR和RT-PCR的组合，其中的“RT”是Reversetranscription（逆转录）的意思，所以RT-qPCR就是结合了荧光定量技术的逆转录PCR，即以mRNA或总RNA为模板，先反转录得到cDNA，再以cDNA为模板，通过荧光定量PCR进行定量检测分析。因为RT-PCR只可以定性，但不能进行定量分析。与RT-PCR一样，RT-qPCR定量分析RNA也有两种方法：一步法和两步法。两种方法都需要先将RNA反转录为cDNA，然后再将其作为qPCR扩增的模板，只是一步法中的RT和qPCR在同一试管中进行，两步法中的RT和qPCR是按顺序分开进行。