细胞传代步骤（细胞传代的过程）

细胞传代步骤

细胞传代培养（subculture），细胞传代步骤，当原代培养成功以后，随着培养时间的延长和细胞不断分裂，一则细胞之间相互接触而发生接触性抑制，生长速度减慢甚至停止；另一方面也会因营养物不足和代谢物积累而不利于生长或发生中毒。

细胞传代步骤（细胞传代的过程）

将培养物分割成小的部分，重新接种到另外的培养器皿（瓶）内，再进行培养的过程被称之为细胞传代培养。对单层培养而言，80%汇合或刚汇合的细胞是较理想的传代阶段。

耗材准备

在实验开始前，需要把实验用品准备齐全。

酒精、预热好的完全培养基、PBS缓冲液、胰酶、培养瓶或培养皿、移液器、移液管、离心管等

实验用的超净工作台需提前半小时照射紫外线。

实验操作

以贴壁细胞培养为例

1、穿好细胞房专用的实验服，戴好灭菌手套和口罩。

细胞传代的过程

养细胞的小伙伴们都知道，细胞一定要传代，因为细胞在培养过程中不断的繁殖，细胞传代步骤，数量也随之增加，然而培养皿/培养瓶的空间有限，增殖受到抑制，细胞传代步骤，所以必须将一部分细胞移至别的培养皿/培养瓶，让细胞有足够生长空间。

细胞传代也不仅仅是为细胞安一个更大的“家”，更重要的，是使细胞系或细胞株进一步增殖，这样，我们才能有足够的细胞做各种各样的实验。

但是，对于传代的时间，很多小伙伴都掌握不好，因为对于不同的细胞来说，判断能否开始传代的标准略有不同，今天，我们就主要来聊一下，细胞传代的时间问题。

什么时候进行细胞传代?

对于贴壁培养和悬浮培养而言，判断是否需要传代主要看以下2个方面：

•细胞密度：

贴壁培养细胞进入对数生长期、未达到汇合状态时即应进行传代，正常细胞达到汇合状态时会停止生长(接触抑制)，重新接种后需要较长时间才能恢复，转化细胞即使达到汇合状态也能继续增殖，但是在经过大约两个倍增时间后通常会变质。类似地，

细胞传代流程图

不少人在医院有过这样的经历，医生说准确的诊断需要细胞培养，一般这项检查都需要好几天，不明就里的人肯定特别好奇，这细胞怎么培养呢？是如何培养出来的呢？下面是我们的实验员培养细胞的心得体会，大家从中可以了解一下细胞培养的背后。

一养细胞深似海，从此自由是路人。开始养细胞之前就要做好随时照顾它的心理准备，三天打鱼两天晒网不仅无法养出状态绝佳的细胞，还有可能让娇贵的细胞宝宝全军覆没，那么，怎么才能培养出符合条件的细胞呢？

1、选择正确的培养基

在养细胞之前，就要了解，你所养细胞的来源以及种类和名称，查阅一定量的文献，确定所需培养液种类以及是否需要添加特殊成分，常用的细胞培养液有L-DMEM、H-DMEM、α-DMEM…等等，一些常见的细胞基本可以使用这几种培养基中的一种来培养，有的需要加入一定其他成分，这需要根据不同的细胞类型，查ATCC细胞库或者查文献，细胞传代步骤，才能找到所需最佳培养液。选择正确的培养液是养好细胞的第一步。