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更新时间:2025-11-09
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1.组织/细胞线粒体提取试剂盒,线粒体提取试剂盒,K288-50,针对于组织和细胞

线粒体提取试剂盒(线粒体提取试剂盒都是什么组分)
2.线粒体DNA纯化试剂盒,K389-25,K389有助于从哺乳动物培养的细胞或组织中纯化高质量的线粒体DNA。利用密度梯度分离法从其他细胞器中分离线粒体。随后进行酶促反应以从线粒体中释放DNA。释放后的线粒体DNA进一步从核DNA组分中纯化出来,并在离液条件下吸附到硅胶离心柱上,从而无需使用有毒的有机化合物或溶剂。
3.线粒体DNA提取试剂盒,K280-50,与K389不同,K280不是基于线粒体的密度梯度分离,而是基于试剂的方法。
4.酵母线粒体提取试剂盒,K259-50,适用于酵母细胞的线粒体纯化
5.酵母线粒体(S.cerevisiae),1222-50,线粒体呼吸研究,复合物的组装,细胞凋亡,mtDNA和mtRNA以及用于蛋白质谱分析
采用美国Promega公司生产的全血线粒体萃取试剂盒迅速提取mtDNA后置于-80℃恒温保存。经定量鉴定合格后的DNA,线粒体提取试剂盒,采用聚合酶链反应(PCR)法扩增目的片段,上游引物为:5-CCCCATGCTTACAAGCAAGT-3,下游引物为:5-GCTTTGAGGAGGTAAGCTAC-3。应用PCR预混试剂(Promega,Madison,WI,美国)、PCR仪(ASAppliedBiosystems9902,美国)进行分析,PCR具体反应条件为:95℃预变性2min,95℃变性30s,55℃退火30s,72℃延伸1min,38个循环,最后于72℃延伸5min。PCR扩增产物经琼脂糖凝胶纯化后,采用ABIPRISM®BigDyeTerminatorv3.1循环测序反应试剂盒进行DNA测序。同一标本采用双向、测通、重复测序。
利用CRISPR-Cas9基因编辑技术生成CD38敲除(KO)细胞株。将非靶向(NT)或CD38-KOJ558细胞皮下注射到免疫正常的BALB/c小鼠和免疫缺陷的NSG小鼠中。将标记的NT和KO细胞与小鼠骨髓基质细胞(OP-9)进行基质粘附比较。采用PromegaGlo定量分析细胞内烟酰胺腺嘌呤二核苷酸((NAD,辅酶Ⅰ)含量。采用线粒体分离试剂盒(ThermoScientific)分离线粒体。通过海马代谢仪(Seahorse)对耗氧率(OCR)和细胞外酸化率(ECAR)进行量化分析。采用模块化低氧室评估细胞在缺氧下的反应。采用碘化丙啶染色法定量分析细胞周期。
我们利用表达CD38的小鼠浆细胞瘤细胞株J558,研究CD38在小鼠模型中的作用。惊人的是,与注射NT细胞的BALB/c小鼠相比,注射CD38-KO细胞的BALB/c小鼠肿瘤体积显著减少(第25天时,线粒体提取试剂盒,113mm3(KO)vs1293mm3(NT),p<0.001)。相反,KO和NTJ558细胞在体外的细胞增殖和集落形成情况几乎相同,线粒体提取试剂盒,表明CD38缺失的影响高度依赖环境发挥作用。
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