甲基红试验（甲基红试验阳性）

甲基红试验

以下试验在18-24小时孵育期结束后，甲基红试验，添加如下试剂：

甲基红试验（甲基红试验阳性）

1.甲基红试验：第1孔

加1-2滴甲基红试剂（I007）

试剂保持红色为阳性

试剂脱色变黄为阴性

2.伏-普试验：第2孔

加2-3滴Barritt试剂A(R029)和1-2滴Barritt试剂B（R030）

5-10分钟内出现粉红色为阳性

无颜色变化或有轻微变化为阴性。

12种生化反应

1

甲基红试验

2

伏普试验

3

尿素酶试验

4

H2S产生试验

5

柠檬酸盐利用试验

6

赖氨酸脱羧试验

7

ONPG试验

8

乳糖发酵试验

9

阿拉伯糖发酵试验

10

麦芽糖发酵试验

11

山梨醇发酵试验

12

卫矛醇发酵试验

鉴定的沙门氏菌物种

沙门菌大部分血清型（Mostserotypes）

沙门菌伤寒血清型（SerotypeTyphi）

甲基红试验阳性

选择健康、活泼无外伤，平均体长为（6.3±0.6）㎝的黄颡鱼作试验鱼。在每个1.0m×1.0m×0.5m的塑料水族箱中饲养30尾黄颡鱼，每天投喂相当于鱼体重2.0％的人工配合饲料（盐城裕达饲料有限公司生产的黄颡鱼专用配合饲料）。驯养10d，待供试黄颡鱼适应环境，并确认无疾病症状后，开始试验。试验期间日均换饲养水量约50.0％，连续充氧并且及时清污。设置4组试验组及2个对照组，每组30尾黄颡鱼。利用从患病黄颡鱼体内分离并经过纯化培养的5个菌株，在BHI培养基中培养72h后，用灭菌生理盐水洗下菌落、稀释成浓度为3.2×l07cfu/mL，作为攻毒菌液备用。

采用2种方法进行活菌攻毒，一种是注射法攻毒法。即直接对每尾黄颡鱼的胸鳍基部注射菌浓度为3.2×l07cfu/mL的活菌液0.1mL后，放入水族箱中继续饲养观察（图4）。每个菌株制备的菌液采用2个平行组作为注射法试验组，对另一组黄颡鱼注射相同剂量的灭菌生理盐水，作为注射法的对照组。

甲基红试验阳性结果为

该菌触酶试验阳性，氧化酶试验通常为阳性，不水解明胶或浓缩血清，甲基红试验，不溶解红细胞，吲哚、甲基红试验和VP试验阴性，石蕊牛乳无变化，不利用柠檬酸盐。绵羊布鲁氏菌不水解或迟缓水解尿素，其余种均可水解尿素。除绵羊布鲁氏菌和一些犬种布鲁氏菌菌株外均可还原硝酸盐和亚硝酸盐。沙林鼠布鲁氏菌在常规胨水培养基中可由葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖和木糖产酸而不产气。

1.3抵抗力

本菌对外界自然环境的抵抗力较强，在粪便中可存活120d，污染的土壤和水中中可存活1～4个月，在鲜乳中可存活3～15d，乳和肉食品中约存活2个月。低温下可存活1个月左右，冰冻状态下可存活数月。

该菌对理化因素比较敏感。在日光直射或干燥条件下抵抗力较弱，在腐败的尸体中很快死亡。一般在直射光作用下10～20min死亡。该菌对湿热很敏感，50～55℃60min内死亡；60℃30min内死亡；70℃10min内死亡；巴氏消毒法可以杀灭该菌，高压消毒可使该菌瞬间死亡。该菌在自然界的生存力受气温、湿度、pH影响较大，甲基红试验，pH7.0及低温下存活时间较长。该菌对消毒剂较敏感，2%来苏儿、石炭酸、氢氧化钠溶液可在1h之内杀死细菌；5%的新鲜石灰乳2h、1%～2%的甲醛3h即可将其杀死；0.5%双氯苯双胍己烷、度米芬、消毒净或新洁尔灭5min内即可杀死该菌。该菌对四环素最敏感，其次是链霉素和土霉素，甲基红试验，但对杆菌肽、多黏菌素B和多黏菌素M、林可霉素有很强的抵抗力。