Lipo3000转染细胞的步骤及注意事项（lipo3000转染细胞原理）

关于细胞转染，有许多常用的转染试剂。下面简单介绍下

Lipo3000转染细胞的步骤及注意事项

。

Lipo3000转染细胞的步骤及注意事项（lipo3000转染细胞原理）

实验准备

：

Lipofectamine3000转染试剂

、

Opti-MEM

（可以用无血清的培养基代替）

实验步骤

1.

70–90%

注：对于HEK293，6孔板一般铺50万个细胞左右。对于PC9,24孔板一般铺5-10万个细胞。由于不同细胞，生长状况不太一样，需要根据情况调整。

2.

Opti-MEM

Lipofectamine3000

，充分混匀。

3.

Opti-MEM

DNA

DNA

P3000

4.将上面两步溶液合在一起，混匀并孵育10-15mins。

5.

6.37°C

2–4

注意事项：

1.Opti-MEM需要37℃水浴锅预热。

2.

siRNA

siRNA

P3000

3.

Lipo3000

6

3.75ul

7.5ul

4.Opti-MEM

Lipo3000

Opti-MEM

P3000

15mins

5.

对于比较好转染的细胞，如HEK293

PEI

Lipo3000

CO-IP

10cm

PEI