脂质体转染（脂质体转染实验报告）

脂质体转染

重新做了转染实验，脂质体转染，效率还是不行，实验一直卡在转染这一步，导致后续实验无法进行，我又又又emo了……

脂质体转染（脂质体转染实验报告）

什么是细胞转染？

为什么会出现转染效率低？

转染实验应该注意什么？

大家是否也遇到过类似的问题？不用担心，针对以上问题我们准备了一份超级详细的「转染攻略」，没有废话，全是干货，一定要看到最后！（文末还准备了福利哦）

转染攻略之：

4种转染方法「头对头」比较

细胞转染是指将外源分子如DNA、RNA、蛋白质等导入到真核细胞的技术。随着基因和蛋白功能的深入研究，转染已经成为科研实验中最常用的技术手段之一。

细胞转染技术主要分为三大类：物理介导法、化学介导法及生物介导法，详见图1。

图1四种细胞转染方法汇总

理想的细胞转染方法应具有转染效率高、细胞毒性小及重现性好等特点。目前常用的转染方法有阳离子聚合物转染、脂质体转染、电穿孔和病毒感染，不同的转染方法各有利弊，没有一种转染试剂是普遍适用的，我们需要依据自己的实验需求选择合适的转染技术及转染试剂，才有可能得到理想的实验结果。常用转染方法的原理，特点和适用范围详见表1：

脂质体转染实验报告

说起细胞转染，脂质体现在是各实验室的最流行的转染技术，但其在转染过程中的毒性较大，且本身会参与细胞生理活动,引起基因表达的上调或下调，这可能会对相关研究数据产生干扰，甚至影响研究的结论。近年来国际上推出了一种新型的阳离子聚合物，作为基因载体时以适用宿主范围广，操作简便，对细胞毒性小，转染效率高受到研究者们的青睐，让我们一起来了解一下其中具有完美结构的树枝状聚合物吧！

树枝状聚合物具有精确的三维结构，因其高度分支，像树一样的结构而与其他聚合物区分开来。结构上由三部分组成：

（1）中心小分子始发核；

（2）内部的重复分支单元；

（3）表面大量的终端功能组。

图1.树枝状高分子聚合物结构示意图

这些特点决定树枝状聚合物在结构上高度对称，分子形状为球形，尺寸在纳米范围，其体积和形态可以在合成的过程中加以控制，而合成的分子大小是转染效率的关键因素。分子内部具有广阔的空腔，可包裹小分子如药物，表面的终端功能基团不但可进行结构修饰而且赋予了它很好的溶解性，各个终端基团可以起到挂钩的作用，与细胞表面的多价分子附着点结合，从而有利于黏附各种有用的外源分子，针对不同的细胞，连接特定的蛋白或受体，以及携带磁性等，都可以使基因转移具有靶向性。

脂质体转染试剂

细胞转染对初接触细胞实验的科研人员而言，是一道难过的坎儿，细胞转染率低的话，你珍贵的细胞可能就只能扔掉了。

一、转染的途径大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类：

1.物理介导：电穿孔法、显微注射和基因枪属于通过物理方法将基因导入细胞的范例。

2.化学介导：方法很多，如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导的技术。

3.生物介导：方法有较为原始的原生质体转染，和现在比较多见的各种病毒介导的转染技术。

理想细胞转染方法，应该具有转染效率高、细胞毒性小等优点。病毒介导的转染技术，是目前转染效率zui高的方法，同时具有细胞毒性很低的优势。但是，脂质体转染，病毒转染方法的准备程序复杂，脂质体转染，常常对细胞类型有很强的选择性，在一般实验室中很难普及。其它物理和化学介导的转染方法，脂质体转染，则各有其特点。