如何利用PEI转染细胞呢（pei转染细胞步骤）

转染细胞的方法有很多，这里介绍一种比较经济实用的转染试剂--聚乙烯亚胺(即PEI

PEI（polyethylenimine）是一种带有高电荷阳离子的多聚物，非常容易结合带负电荷的DNA分子，形成复合物，并转染到贴壁和悬浮细胞中，常用于大规模瞬时转染表达。

如何利用PEI转染细胞呢（pei转染细胞步骤）

如何利用PEI转染细胞

实验前准备：

PEI(polysciences,Cat#:24765-1)

,将PEI配置成1ug/ml，用0.2μm滤膜过滤，并分装储存于负80度。

实验步骤（以转染293T为例）：

1.在六孔板中铺10万个细胞，在二氧化碳培养箱中孵育过夜。

2.在100ulDMEM中加入2ug目的质粒。如果是10cm皿可以加入5ug质粒。

3.加入10ulPEI，立即混匀。室温孵育10min。

4.然后再补加600ulDMEM培养基。

5.吸掉六孔板中的培养基，然后将700ul混合液慢慢加入到细胞中，轻轻摇晃混匀。

6.在二氧化碳培养箱中孵育3小时，然后加入2mlwan全培养基（DMEM+10%FBS）。

7.培养箱中孵育48小时，进行下一步实验。

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如何利用PEI转染细胞呢？

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怎么选择瞬时转染和稳定转染呢？